标准曲线的制作中，会有这样那样的问题，比如常有人问：一定要做5个点？线性相关系数R值必须几个9才达标？标曲是每天都做还是每次都做？标曲是否必须通过原点？……
1、标准曲线的制作依据？
GB/T22554-2010《基于标准样品的线性校准》中：
1）标准曲线的浓度范围应覆盖正常操作条件下的被测量范围；
2）标准样品的组分尽量与被测样品组分一致；
3）标准样品的浓度值应等距离的分布在被测量范围；
4）标准样品的个数至少应有3个浓度；
5）每个标准点至少重复2次，这个重复是指从稀释开始；如果国家标准有相应的浓度系列推荐，尽量按国家标准。工作中我们经常采用线性校准，因为线性方程最为简洁。
2、什么是校准曲线？
校准曲线包括标准曲线和工作曲线，前者用标准溶液系列直接测量，没有经过预处理过程，这对于样品往往造成较大误差；而后者所使用的标准溶液经过了与样品相同的消解、净化、测量等全过程。
3、首先标曲要做几个点？
4、标曲R值是几个9才合格？
实验室应按检测标准（方法）的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准（方法）如无具体的要求，至少使用5个标样（除空白外）建立线性标准曲线，每个点重复测定1-3次，对于筛选方法，线性回归方程的相关系数不应低于0.98，对于确证方法，相关系数不应低于0.99。其实，大于0.99是判断是否为线性相关的一个标准，实际应用中线性大于0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近最高浓度一半（中间浓度）的位置才比较准确，如果线性大于0.999的话，在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。
如果检测的线性不好，可以减少标准的覆盖范围，将标准的浓度调整到待测样品浓度附近，这样结果也是非常准确的。例如，样品的浓度约20ppb，但在0~50ppb范围建立标准曲线，但线性非常不理想，这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间，作五个标准。
5、标准曲线的检验？
6、标准曲线有效期的规定？
（1）标准曲线属于实验室质量控制的范围，按照《实验室资质认定评审准则》中结果控制的要求：
定期使用有证标准物质（参考物质）进行监控和/或使用次级标准物质（参考物质）开展内部质量控制。
（2）准则中并未对“定期”进行规定，所以如果“定期”，就根据实验室的实际情况来定了。
（3）既然准则上没说明，那根据一般的分析教材，当实验条件（包括药剂、人员、仪器等）发生变化时，最好重新制作标准曲线。一般来说仪器如果长期使用，并经过检定，是处于稳定状态，而人员药剂的变化往往会较大。如果说每次换个人操作都要换曲线，那工作量就太大了。
7、每次开机都必须做标准曲线？
从药品检测的要求来说，因为：
1、每天所配的流动相都会有所不同，导致出峰的时间都会有一定的差异，峰面积相应都有所差异。
2、检测器光能也在不断的衰弱，因此其每天的相应值也有所不同，其峰面积也有差异。基于以上原因，原则上应该是每天都要进行标准曲线校正的。标准曲线不要每次都做，但是每次必须进标准品样品；因为每次你的流动相和原来的不可能完全一样，同时仪器的状态也在变化，所以不同批次间的保留时间是不一致的，所以你必须用随行标准品来定位与定量。
8、校准曲线能不能长期使用？
不能长期使用，可以短期使用，使用前做一个单点重校，测试一个零点和中间点，测出一个纠正过的曲线。
9、标准曲线是否必须过原点？
看要求，如果零点的有效值是小数点后面第四位才有数字不影响测试，超过0.001就不行了。
10、标准曲线的线性范围？
最高点一定要大于被测试样品（物质）10%。
11、相关系数的有效数字？
至少二位以上。
12、Y=bX和二次曲线的选用？
看标准要求，以国标或行业标准为依据。测试范围窄的建议使用一次线性方程，测试范围宽点使用非线性或二次方程。
校准曲线的斜率、截距保留几位有效数字？
1、参考依据，参考标准HJ 630,其他行业参考使用。
2、相关系数R保留的有效数字，校准曲线相关系数只舍不入，保留到小数点后第一个非9数字。如果小数点后多于4个9，最多保留4位。
3、校准曲线斜率的有效位数，校准曲线斜率的有效位数，应与自变量的有效数字位数相等。
4、校准曲线截距的有效位数，校准曲线截距的最后一位数，应与因变量的最后一位数取齐。
5、自变量和因变量的有效数字，记录测定数值时，应同时考虑计量器具的精密度、准确度和读数误差。对检定合格的计量器具，有效数字位数可以记录到最小分度值，最多保留一位不确定数字。
6、实例
校准曲线的相关参数如图：
相关系数：
相关系数计算结果为：R=0.99997157，按照规则，小数点后的9多余4个则，最多保留4个9，所以，R=0.9999
斜率：
斜率计算结果为：8.11，按照规则，斜率和自变量的有效数字位数相等，自变量的有效数字的位数相同，自变量的有效数字有2位的（如，2.0），有三位的（如，16.0），保持曲线更精确，取有效数字多的位数，取3位。
所以斜率取：8.11
截距：
计算的截距为0.003536，按照规则，截距的最后一位数，应与因变量的最后一位数取齐，因变量的最后一位为效数点后一位。所以截距取 0.003。
